Tinciones

Question 1

PREPARACIONES EN FRESCO

Answer 1

• Observar la movilidad, tamaño y agrupación de los microorganismos en su estado natural
• Observar microorganismos vivos
• No hay un buen contraste
• Se les puede agregar una gota de colorantes muy diluidos que aumenten el contraste de la célula sin afectar su viabilidad
• En el microscopio se observan mejor disminuyendo la intensidad de la luz
  • En gota pendiente o suspendida: Colocar la muestra en un cubreobjetos e invertir rápidamente sobre un portaobjetos excavado
  • En un portaobjetos normal: Colocar una asada o gota de la muestra entre el porta y el cubreobjetos

Question 2

PREPARACIONES FIJAS Y TEÑIDAS

Answer 2

Consiste en una capa de la muestra extendida sobre un
portaobjetos libre de grasa.
Debe ser lo suficientemente delgada para permitir el paso de la luz a través de ella.

Question 3

TINCIONES POSITIVAS

Answer 3

• Colorantes:

• ácidos (eosina): Se combinan con los componentes básicos de la célula (citoplasma)
• básicos (azul de metileno, cristal violeta): Se combinan con los componentes ácidos (ADN y ARN)

Question 4

TINCIONES SIMPLES

Answer 4

Un solo colorante, principalmente básicos

Question 5

TINCIONES DIFERENCIALES

Answer 5

Combinación de colorantes, mordentes y decolorantes

Question 6

TINCIONES SELECTIVAS

Answer 6

Permiten observar un organelo celular determinado:

• endosporas
• flagelos
• genoma
• cápsula

Question 7

TINCIÓN DE GRAM

Answer 7

• TÉCNICA:
- Cristal violeta: Colorante primario
- Lugol: Mordente (cristal violeta-yodo-ribonucleato de magnesio)
- Alcohol-acetona: Decolorante
- Safranina: Colorante de contraste
• FUNDAMENTO
Gram+ pared gruesa, mayor contenido de peptidoglucano, el decolorante deshidrata y reduce la permeabilidad de la pared
Gram- pared delgada, poco peptidoglucano y pocos enlaces. el decolorante disuelve los lípidos, abre los poros y facilita la salida del cristal violeta. Por lo tanto las bacterias toman el colorante secundario.

Question 8

TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN

Answer 8

• TECNICA:
- Fucsina fenicada: Colorante primario que se une a
las sustancias céreas
- Alcohol-ácido: Decolorante
- Azul de metileno de Löeffler: Colorante de contraste.
La tinción en caliente suaviza las ceras y facilita la
solubilización del colorante primario en ellas.

Question 9

Usos Tinción de Gram

Answer 9

• Muestra la morfología celular.
• Permite ver diferencias estructurales (pared celular)
• Identificación presuntiva.
• Guía para el tratamiento antimicrobiano.
• Selección de pruebas bioquímicas adicionales.