Técnicas en BM Flashcards
¿Cuál es el periodo de retraso mínimo entre la colección de la muestra y su cultivo?
24 horas
¿Qué células sirven para las técnicas de BM y citogenética?
Leucocitos, fibroblastos y otros tejidos
Técnica de diagnóstico prenatal con probabilidad de pérdida fetal de 2% o más que se realiza en la semana 18
Cordocentesis
Prueba que se realiza en la semana 10 a 13 con un riesgo de pérdida de 0.7 a 1%
Biopsia de vellosidades coriónicas
La amniocentesis es el método de diagnóstico prenatal con menor riesgo y se realiza entre las 14 y 18 semanas: V/F
Verdadero
¿Qué elementos son necesarios para la siembra celular?
Medio, suero fetal, antibiótico y mitógeno
¿Qué elementos son necesarios para la cosecha celular?
Colchicina, solución hipotónica, solución de carnoy, giemsa
¿Cuáles son los mitógenos de Linfocitos T?
FHA, concavalina A, pokeweed e IL-2
¿Cuáles son los mitógenos de Linfocitos B?
LPS, VEB, pokeweed
¿Qué puede detectar el cariotipo de alta resolución?
Anomalías numéricas y estructurales de al menos 3 megabases, monosomías, trisomías…
¿Dónde está la alteración en el cromosoma X frágil?
Xq 27.3
El RNA se puede extraer de cualquier célula nucleada: V/F
Falso (tejidos frescos que expresen ese RNA particular, luego se convierte a cDNA para su análisis)
Al centrifugar una muestra, ¿dónde quedan el DNA y el RNA?
DNA en fase acuosa y RNA en fase orgánica
En electroforesis, corre más la proteína más pequeña de negativo a positivo: V/F
Verdadero
¿Con qué se tiñen las preparaciones en electroforesis?
Bromuro de etidio
¿Qué es una región de ADN con extremo romo?
Moléculas de DNA que son cortadas con la misma enzima de restricción
Método que requiere uso inicial de electroforesis, luego se desnaturaliza la muestra y se transfiere a nitrocelulosa. Se utilizan sondas ssDNA específicas y se observa en rayos X
Southern Blot
El southern blot sirve para ver DNA-RNA mientras que el northern para ver DNA genómico: V/F
Falso (al revés)
¿Cuál es la mezcla de reacción para PCR?
taq-polimerasa + desoxirribonucleótidos + 2 oligonucleótidos o primers + muestra DNA + buffer
¿Cuántos ciclos se usan habitualmente en PCR?
25 a 35
Describa los pasos, tiempos y temperaturas del PCR
Desnaturalización (1m a 94C) - Hibridación (45s a 54C) y Extensión (2m a 72C)
¿Cuál es la utilidad del PCR?
Es el paso inicial para otras técnicas, puede detectar mutaciones puntuales en su modalidad PCR-ASO
¿Qué no puede detectar la PCR?
Cambios en la secuencia, alteraciones cromosómicas y deleciones en estado heterocigoto
PCR que detecta dosis génica, metilación, cambios para los que este diseñada la sonda, cargas viralespero no traslocaciones balanceadas
Q-PCR
PCR que utiliza ensimas de restricción que se diseñan especialmente para buscar un sitio de corte específico
PCR-RFLP
¿Qué detecta la PCR-RFLP?
Mutaciones puntuales, deleciones o duplicaciones reconocibles por una endonucleasa, pero nada mayor a 8bp
¿Qué elementos se utilizan para hacer la secuenciación por método de Sanger?
ddA/ddG/ddC/ddT fluorescentes, nucleótidos normales, el DNA a estudiar, oligonucleótido y DNA polimerasa
¿Para qué sirve la secuenciación?
Detecta el orden preciso de los nucleótidos pero no puede ver deleciones grandes o en estado heterocigoto
Amplificación múltiple que permite utilizar el mismo par de cebadores para hasta 45 sondas de DNA
MLPA
¿Para qué sirve el MLPA?
Determina con certeza dosis génica en pacientes con deleciones o duplicaciones grandes y delimita puntos de ruptura
Tipo de PCR que permite encontrar secuencias flanqueadoras alrededor de una secuencia para la que no hay primers, identifica insertos genómicos
PCR inversa
Técnica de PCR que usa dos pares de primers que otorga gran especificidad a los productos
PCR anidada
PCR que se utiliza para amplificar moléculas de RNA a través de la creación de cadenas de DNA complementario
RT-PCR
PCR que utiliza varios primers de diferentes tamaños para realizar diversas pruebas sobre una sola muestra
PCR Múltiple
PCR útil para detectar cambios en islas CpG que se realiza utilizando dos pares de primers
PCR sensible a metilación
