Técnica histológica Flashcards
Porque los lípidos no pueden teñirse con HyE
Porque no tienen carga electrica
Paso de la técnica histológica se descarta para la tinción de lípidos. Y por cual se reemplaza
Inclusión en parafina. Se reemplaza por congelamiento
Microscopía que hace visible la membrana plasmática
Microscopía electrónica de transmisión(MET)
Espesor de la membrana basal
50nm
Espesor de la membrana plasmática
2-10nm
La eosina(colorante ácido, con carga negativa) tiñe de …………. a las estructuras …………
Rosa. Básicas(Acidófilas o eosinófilas) con carga positiva
Estructuras celulares que tiñe la hematoxilina (4)
- Ácidos nucleicos
- Ribosomas
- Nucleo(mas intenso en cromatina densa)
La hematoxilina(colorante básico, con carga positiva) tiñe de …………. a las estructuras …………
Azulado o violaceo. Ácidas(basófilas) con carga negativa
Estructuras celulares que tiñe la eosina (3)
- Fibras proteicas intracelulares(actina y miosina)
- Fibras proteicas extracelulares(colágeno) 3. Otras sustancias básicas con cargas electricas positivas. Grupos amino.
1 metro tiene …… cm
1 metro tiene …… mm
1 metro tiene …… um
1 metro tiene …… nm
1 metro tiene …… Å
100
1000
1.000.000
1 000.000.000(mil millones)
10.000.000.000
Característica de la tinción de sudan
Sudan es un colorante lipofilico que tiñe de rojo a los lípidos. Y antes de su tinción no se debe incluir la muestra en parafina. Pero si congelarla
Característica de la tinción tricrómica
Tipo de tinción que permite diferenciar diferentes estructuras: las fibras de colágeno, los nucleos y los citoplasmas Utilizan hematoxilina, la fucsina y el verde luz.
VERRRRRRRR
Colágeno(azul), Fibras elásticas(verde),Células musculares(rosa/violeta-fucsina)
Características de la tinción con azul de toluidina
El azul de toluidina tiñe a las estructuras basófilas de azul(ortocromacia: Cuando se tiñe con su color original)pero al reaccionar con sulfatos y fosfatos con carga negativa, el colorante se polimeriza y los tiñe de violaceo o rojizo(metacromasia. Cuando el color de tinción depende de la estructura a la que tiñe)
Método de tincion apropiado para la membrana basal
PAS
Procedimiento de la tecnica de PAS
El ácido periódico rompe las moléculas de los glúcidos y expone sus grupos aldehido, y reactivo de schiff tiñe a estos de rojo
La membrana basal no se distingue con HyE porque …..
Al ser eosinófilo, no se distigue del tejido conectivo subyacente. Es dificil de distiguirla
Proceso de la técnica histológica
Obtención de la muestra por biopsia o necropsia
Fijación con formaldehido al 10%. Para evitar que se pierda o se degrade el tejido
Deshidratación, en concentraciones crecientes de alcohol
Aclaramiento con xilol. Para sacar el alcohol. Para que ingrese la parafina(ya que el xilol es soluble parafina)
Inclusión en parafina a 60°C. Para endurecer la muestra(cuando se enfría)
Corte de muestra con micrótomo(finas laminas). Montar en porta objeto y desparafinar en xilol
Rehidratación en concentraciónes decrecientes de alcohol, hasta llegar a agua destilada
Coloracion con hematoxilina(luego se lava) y con eosina posteriormente al lavado
Deshidratación en concentaciones crecientes de alcohol, luego xilol
Montaje de la muestra. Balsamo de canadá
¿Porque preparado de HyE el citoplasma de un acino mucoso se ve pálido?
Porque el mucus de disuelve con esta técnica
Tipo de miscroscopías
MO Microscopía Óptica
ME Microscopía Electrónica
- MEB Microscopía Electónica de barrido
- MET Microscopía Electónica de transmisión
MFA Microscopio de Fuerza Atómica
Que es el limite de resolución
Minima distancia entre dos puntos en la que se persiben separados Minima distancia en la que 2 puntos pueden verse por separado
Factores que definen el límite de resolución
Aumento y poder de resolución
La cantidad de aumentos en el microoscopio se define con ………
X(Numero de aumentos)
Paso de la técnica histológica en la que se pierden/diluyen las grasas
Aclaramiento en xilol
Como se denominan las estructuras que aparecen tras la técnica histológica y no son reales de la muestra
Artefacto de la técnica histológica
Tipo de miscroscopía que permite ver estructuras nanométricas en medios acuosos. Observaciónes a nivel molecular de organismos
MFA(Microscopio de fuerza atómica)
Tipo de miscroscopía que permite ver estructuras supracelulares, tipos celulares y alguna organela, pero no estructuras atómicas
MO Microscopio óptico
En que consiste la inmunohistoquímica
Marcar estructuras con anticuerpos específicos, que luego se identifican por fluorescencia o acción enzimática
Los mastocitos pueden detectarse mediante la tinción con ……. debido a …….
Azul de toluidina. A que sus gránulos de heparina son sulfatados y el azul de toluidina al reaccionar con estos los tiñe de rojo-violáceo
Los ribosomas se tienen con …….. por …….
Hematoxilina(basófilo). Los ácidos nucleicos