Technologies de l'ADN

Question 1

Quelle est la fonction d’une nucléase ?

Answer 1

Une nucléase est une enzyme qui clive les liaisons phosphodiesters de brins acides nucléiques entre deux nucléotides.

Question 2

Quelle est la différence entre une exonucléase et une endonucléase ?

Answer 2

Exonucléase : Coupe à partir d’une extrémité

Endonucléase : Coupe au milieu de la chaine

Question 3

À quoi servent les endonucléases de restriction ou enzymes de restriction ?

Answer 3

Défense immunitaire contre bactéries et virus en coupant l’ADN à des endroits précis

Question 4

Quelles types de séquences sont reconnues par les endonucléases de restriction ou enzymes de restriction ?

Answer 4

Des séquences palindromiques (séquence qui se lit de la même façon dans les 2 sens)

Question 5

Quelle enzyme permet de reformer les liaisons phosphodiesters préalablement clivées par les endonucléases de restriction ou enzymes de restriction (ligation) ?

Answer 5

L’ADN ligase

Question 6

Vrai ou faux, une fois coupés, les fragments d’ADN peuvent être séparés selon leur taille par électrophorèse sur gel d’agarose ?

Answer 6

Vrai

Question 7

Quel produit chimique permet la détection des fragments d’ADN sur le gel d’agarose ?

Answer 7

Le bromure d’éthidium

Question 8

Pourquoi l’efficacité de ligation de bouts francs est 100 fois plus faible que celle de la ligation de bouts collants ?

Answer 8

Car les bouts collants s’apparient entre eux donc, stabilisent les interactions

Question 9

Qu’est-ce qu’un plasmide ?

Answer 9

Il s’agit d’un cercle d’ADN bicaténaire qui peut se répliquer de façon autonome dans un organisme hôte.

Question 10

Qu’est-ce que le clonage d’un fragment d’ADN ?

Answer 10

Il s’agit de l’insertion d’un fragment d’ADN dans un vecteur (plasmide) clivé préalablement par une endonucléase de restriction ou enzyme de restriction.

Question 11

Nommez 3 éléments clés que comporte un vecteur (plasmide) ?

Answer 11

1. Origine de réplication
2. Un gène de sélection (protection)
3. Un site de multiclonage

Question 12

Vrai ou faux, la transformation est le procédé d’introduction d’un plasmide dans une souche de bactérie ou de levure ?

Answer 12

Vrai

Question 13

Que permet l’hybridation ?

Answer 13

Permet de renaturer (double brin) une protéine qui a été dénaturé (simple brin)

Question 14

À quoi sert la méthode Sanger ?

Answer 14

Détecter des mutations dans un gène

Question 15

Quelles sont les étapes de la méthode Sanger ?

Answer 15

1. Séparation du brin
2. Ajout des amorces, des désoxynucléotidiques (dont un est marqué d’un dédioxynucléotide) et de l’ADN polymérase
3. Séparation sur gel et détection des brins synthétisés par extension de l’amorce
4. Lecture de la séquence sur le gel

Question 16

Quel est le principe du PCR (polymerase-chain reaction) ?

Answer 16

1. Séparation des brins (95 degrés Celsius)
2. Hybridation des amorces (55 degrés Celsius)
3. Synthèse par l’ADN polymérase

Question 17

Que permet la PCR ?

Answer 17

Obtenir de nombreux clones à partir d’un seul brin d’ADN

Question 18

Qu’est-ce que Taql ADN polymerase ?

Answer 18

Un type d’ADN polymérase qui tolère les hautes températures (jusqu’à 70 degrés Celsius)