Sistema Nervioso Post Mortem Flashcards
Qué dos tipos de microscopios existen
Unode luz y otro electrónico. El electrónico puede ser de barrido (para ver superficies) y otro para ver el interior (transmisión)
Cómo es la longitud onda del microscopio electrónico
Mucho menor que la del fotón, porque a menor longitud de onda, menor distancia y mayor resolución.
Qué tres procedimientos sirven para la preparación del tejido
- Fijación
- Inclusión
- Corte
Palabras clave de la Fijación
Formol, dos métodos: inmersión y perfusión. Bomba externa, dosis letal de anestesia.
Palabras clave de Inclusión
Ratón, plástico, cera o parafina. Transparente.
Palabras clave de Corte
carnicería. 50 um en humanos; 30 um en roedores.
Tipos de aparatos para el Corte
- Criostato: congelación, cuchilla a baja temperatura (-4C)
- microtomo: congelación (se congela la loncha)
- vibratomo: sin congelación, la cuchilla vibra y saca cortes finos.
Qué podemos teñir
somas, fibras o ambas cosas de las neuronas. Estructuas. Una proteina o el trocito de material genetico. Todo esto puede ser dependiente o independiente de la actividad de la estructura.
Teñimos de qué manera
directa o indirectamente. dependiente o no de la actividad de la estructura.
Importa que el espécimen esté muerto
No importa, la acitividad de la proteína puede seguir latente.
Nissl qué suele teñir sobre todo
Somas.
A qué tipo de tinción pertenece la de las somas
A las tinciones basófilas, basadas en un coloroante de pH básico. Lo básico se une a lo ácido.
A qué se une esta tinción
a los ácidos nucleicos
Qué suele teñir Gallyas
fibras
Está anticuada la de Gallyas
sí, pero se sigue usando
En qué está basada Gallyas
en plata, que tiene especial afinidad por la mielina de los axones
Qué colorea Golgi
Somas y fibras (dendritas y axones)
quien popularizaó a golgi
ramon y cajal
Cómo es el dunfamento de la tecnica de Golgi
un misterio
cuál es su punto debil y principal virtud
que tiñe solo el 5-10% de las neuronas, y pueden asi distinguirse independientemente
En qué consiste la histoquímica
se basa en realizar una reacción quimica sobre el tejido. Durante el proceso el investigador colorea una sustancia quimica para visualizarla.
En qué consiste una reacción química
a partir de un sustrato y por medio de una enzima (proteina) obtener un producto.
Qué es necesario para que la téncia histoquimica funcione
es que la ezima que buscamos tenga que estar todavia activa. debemos manipular la enxima con cuidado para que no muera.
si el tejido lleva años fijado, seguirá funcionando?
la enzima seguirá viva a pesar de que el tejido lleve años fijado, tanto de animal como de humano.
inmunohistoquimica en q consiste
en su caso no visualizamos la actividad de una enzima, sino solo su PRESENCIA
EN Q se basa la inmunohistoquimica
se basa en la afinidad que los anticuerpos tienen por sus antigenos
que tipo de proteinas se investiga en la inmuno…
proteinas MUY cocnretas dentro de las neuronas.
ejemplo de inmuno..
sintetixo artificialmente anticuerpo para que se unan a una enzima especifica.
es necesario q la enzima este activa en la inmuno..
no es necesario, con que este ahi es sufciiente
q es la inmuno.. directa?
visualizamos directamente el anticuerpo que se ha unido al antigeni de interes. solo tenemos un anticuerpo, una señal de 1.
q es la inmuno indirecta
el colorante que cisualizamos no esta unido al anticuerpo,m sino q se añade otro anticuerpo q se une al primer anticuerpo. asi potenciamos la señal, pues habra muchos anticuerpos secundarios q se unana al rpimaria.
hay un unico anticuerpo q se une a lo q interesa, pero 100 mas q se unen al primario.
que es mejor, la directa o la indirecta
indirecta, porq es mucho mas facil de detectar, gracias a los 100 antic secundarios unidos al 1 primario.
que detecta la hibridacion in situ, y q detectamos en concreto
el material genetico al partir del cual se codifica la proteina de interes. las neuronas q tienen la mquinaria necesaria para elaborar cierta proteina incluso aunq esa proteina no se haya sintetizado.
en concreto detectamos el ARN mensajer q codifica para esa proteina
importa q no se haya sintetizado una proteina en la hibridacion in situ?
no, no importa, se puede hacer igualmente.
que tres pasos se dan en la hibridación in situ
- identificar cual es el gen que codifica para la proteina que nos interesa.
- generar en ele laboratorio la secuencia complementaria y marcarla para poder visualizarla
- añadir la secuencia complementaria a nuestro corte de tejido para q se una al gen de interes
a que se refieren las bases neurales de la conducta
a nucleos cerebrales concretos como a la comunicacion que existe entre ellos.
los estudios con trazadores se pueden realizar en humanos?
No, sólo en animales
en q consiste el estudio con trazadores
inyectar una sustancia quimica, el trazador, en una region concreta del cerebro. Despues se deja al animal vivo para q el trazador se desplace a través del transporte axonico a los nucleos diana. finalmente, se sacrigica al animal y se perfunda para q se mantenga.
tipos de trazadores
- anterogrado
- retrogrado
- bidireccionales
trazador anterogrado
captados por el soma de las neuronas y llevados hasta terminales isnapticas por el transporte axoncio
trazador retrogrado
captados por las terminales sinapticos y llevados al soma
trazador bidireccional
soma - terminal
terminal- soma
si quiero saber a q nucleo envian axones las neuronas de la amigdala, q inyecto
un trazador anterogrado en la amigdala
si quiero saber donde esstan las neuronas q proyectan a la amigdala
inyecto uno retrogado
puedo distinguir una de otra con la bidireccional
NO
Hay trazadores transinapticos
sim pasan de una neurona a otra, por lo q podemos saber la ruta complleta que conecta los nucleos de interes
