PRÁCTICA Nº 9 EXTRACCIÓN DE ADN Flashcards
En la extracción celular cuales son los pasos a seguir - 5
- Extracción del ADN de epitelio bucal
- Proceso de purificación
- Cuantificación de ácidos nucleicos
para que se añade la Proteinasa K, el buffer lisis y la RNasa al extraer el ADN
Buffer de lisis: Rompe las membranas celulares y libera el ADN.
Proteinasa K: Degrada las proteínas asociadas al ADN.
RNasa: Elimina el ARN.
En el proceso de purificación que columna se utiliza-5
columna de silice
en el proceso de purificación porque se añade el bufer de elución-5
se utiliza para liberar el ADN de la columna silica gel
¿Para qué se usa el vortex?-5
Para mesclar los buffer con el ADN
Nombre los búferes que se utilizar según orden de utilización y en qué proceso-5
Extracción de ADN de epitelio bucal.
1. proteinasa k
2. RNasa
3. Buffer lisis
4. Etanol 95-100 °/°
Proceso de purificación:
5. Buffer de lavado I y II
6. Buffer de elución
Que muestra se tomó para la extracción del ADN-5
Se hizo un raspado del la mejilla con un hisopo y se extrajo células del epitelio bucal
Para que el buffer lisis funcione que se le hace-5
se le incuba a una temperatura de 55°C por 10 minutos
cuantas veces se centrifuga-5
3 veces 8400 rpm por 1 minuto y el ultimo por 3 minutos
Que tipos de homogenización hay-5
Quimica (Detergentes y proteasas) y mecanica (trituración y homogenizadores)
para que sirve el EDTA-5
Se puede aplicar en soluciones de lisis para formar complejos con los iones mg e inhibir a la DNasas (Proteje al ADN de ser degradado
Que se empleó para ver los ácidos nucleicos-5
Espectrofotómetro
cuáles son los pasos para el método
convencional
. LISISCELULAR
. SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS Y LÍPIDOS
. PRECIPITACIÓN DEL REDISOLUCIÓN DEL ADN
. PURIFICACIÓN
Cuáles son los pasos para el método por Kit comercial
- LISIS CELULAR
- UNIÓN DEL ADN A UNA MATRIZ
- SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS Y LÍPIDOS
- ELUCIÓN DEL ADN
