Partie 1 Flashcards
Les 4 étapes en microscopie optique lumière blanche ou fluorescence
1-fixation ( conserver les cellules dans un état morphologique proche du vivant, très rapide)
2-inclusion (imprégnation et enrobage, plus dur que le constituant le plus dur du tissu)
3-coupe ( fin)
4-coloration ( coupe transparente si pas de coloration non visible)
Il y a deux modalités lesquelles
Immersion des cellules ou tissus
Et perfusion d un animal sacrifié
Quelles sont les fixateurs
Aldéhydes (les plus utilisés) ( formation de ponts méthylène entre lés peptide ou prot
Empêche l autolyse et petrefaction
alcool ( éthanol ou alcools plus lourd)
Ajout possible d autres éléments ( acide et métaux)
Quels sont les facteurs qui influencent la fixation
- volume ( très gros échantillon fixation non efficace)( petit efficace)
- proportion de graisse ( peu mauvaise fixation)
- quantité des minéraux (
- température(élever fixation plus rapide et ambiante ou à 4C fixation optimale)
2 eme étapes milieux inclusion
Paraffine médicale (liquide a 56C, solide entre 20C et 30C)
Résine très dure non miscible a l eau hydrophobe
Résine non ou c est de la résine plasmique miscible a l eau
2 eme étape
Imprégnation
1- déshydratation ( immersion dans des Brainscape d éthanol)
2-bains de solvant intermédiaire( miscible a l eau et à la paraffine )
3- bains de milieu d enrobage (non miscible a l éthanol pour la plupart
2 eme étape
Enrobage
Différente couches successives
solidifications a 20C
3 eme étape
Par un microtome
Étymologie structure fonction obtention
-micro=fin Tome=couper -Bras oscillant Système de fixation du bloc d inclusion Très stable et lourd -lame de rasoir Coupe d un film très fin de paraffine 2 et 5 micro mètre -opaque fripé et fragile
3 eme étape
Étalement
Dépôts de une partie
Film d eau distillée sur une lame de verre
4 eme étape
Réhydratation du tissu
Déparaffinages -bain de xylène - bain d éthanol - d eau distillée Permet l action des colorant
4 eme étape
Les colorant
Différent type issus de l industrie textile Végétaux Teinture Laque A base d argent
4 eme étape coloration de base
Permet architecture du tissu ( technique peu fines mais essentielles)
Coloration trichrome ( noyau cytoplasme et substance intercellulaire)
En cytologie c est la coloration may grunwald giemsa