P8: Animales transgénicos Flashcards
¿Cuáles son las dos formas de producir aniamles transgénicos?
- Inyección pronuclear
- Uso de células madre embrionarias
¿Cuál es la desventaja del uso de inyección pronuclear para producir animales transgénicos?
Que no sabes a dónde se mete el DNA.
Resume el uso de células madre embrionarias para producción de animales transgénicos.
Agregamos secuencia a DNA, se reconoce, se produce recombincación homóloga e insertamos una copia en un lugar determinado.
¿Qué es la recombinación homóloga?
lo que ocurre cuando los gametos se aparean, se da un entrecruzamiento entre las regiones homólogas.
¿Qué papel tiene la recombinación homóloga?
Es lo que le da la variabilidad genética a las especies.
¿Cómo se hace la recombinación homóloga in vitro?
Se usa un vector, tenemos el gen que queremos incluir, al entrar se reconoce al homólogo y después ya se tiene un gen mutado.
V/F
La recombinación homóloga se puede utilizar para agregar marcadores.
Verdadero. Por ejemplo GFP
¿Qué ocurre en un animal knock out?
Se interrumpe la expresión de un gen completamente (bloquean ambos alelos)
¿Qué es un animal knock in?
Aquel con una mutación puntual (en un solo par de bases) Si se expresa el gen pero menos.
¿Cuál es la diferencia entre un knock out y knock in?
Al primero se le bloquea la expresión de ambos alelos, en el segundo sólo de uno.
¿Qué es un animal kncok down?
Aquel en el que se altera el promotor para disminuir la expresión del gen.
¿Cuál es la diferencia entre un kncok in y knocl down?
A pesar de que ambos presentan la expresión del gen disminuída, el knock in es por inhibir un alelo, mientras que en knock down se hace mediante acción sobre el promotor.
¿Cómo puedes lograr un knock down?
Mutación puntual en el promotor, eliminación de una parte de promotor o por RNAi
¿Cómo podemos producir células para inyectar a un animal y crear trangénicos?
Por medio de vectores metemos al ADN de interés (transformación) a las células.
¿Qué métodos de tranformación podemos usar para meter el ADN a las células que cultivamos?
Electroporación o choque térmico.
¿Qué finalidad tiene que las células con mutación tengan resistencia a un antibiótico?
Que al aplicarlo resistan, entonces es una forma de filtrar y quedarnos sólo con las que presentan la mutación.
¿Qué es una quimera en clonación?
Un blastocito que tiene células del embrión y las que yo inyecté por medio del vector.
¿Qué se hace una vez que se tiene al blastocito (que es una quimera)?
Se le implanta a la ratona para que se desarrolle en embrión.
¿Por qué es necesaria la cruza de ratones quiméricos?
Porque habrá población que no presente la mutación, entonces necesitamos cruzar incluso consanguíneos, hasta que la mutación se exprese en toda la desendencia.
¿Qué es la electroporación?
Mediante un campo eléctrico se genera la apertura de poros para que el DNA que queremos entre a las células.
¿Cuál es el papel del hidróxido de Na para la genotificación a partir de la cola de la rata?
desnaturalizar de manera alcalina para que se libere el contenido nuclear.
¿Para que nos sirve la genotificación?
Para ver que tipo de animal tenemos. Puede ser wild type, mutante o heterocigoto.
¿Cuándo decimos que un animal es mutante?
cuando sus dos alelos presentan la mutación (homocigoto).
¿Cuándo decimos que un animal en la línea es heterocigoto?
cuando uno de sus alelos presenta la mutación pero el otro no.
¿Cuándo un animal es wild type?
cuando ninguno de sus alelos presenta la mutación.
