Le Clonage

Question 0

Qu’elle sont les 3 ingrédients pour cloner un ADN d’intérêt ?

Answer 0

1) insert -> ADN d’intérêt génomique ou codant
2) vecteur -> ADN transporteur
3) cellule hôte apte à multiplier le vecteur et son insert

Question 1

Qu’elle est le but du clonage ?

Answer 1

1) obtenir en grande quantité une ADN d’intérêt

Question 2

Concernant les vecteur donner pour les exemple suivant (plasmide, phage gamma, cosmide, BAC, YAC)

• la taille Max de l’insert
• la cellule hôte

Answer 2

1) plasmide 0,2-4kpb cellule eucaryote ou bactérie
2) phage gamma: 20-25 kpb dans une bactérie
3) cosmide 45kpb dans une bactérie
4) bacterial artificial chromosome (BAC) 300kpb dans une bactérie
5) YAC 1000kpb dans une cellule eucaryote

Question 3

Qu’elle sont les deux types d’insert possible et leur avantage et inconvénient ?

Answer 3

1) ADN génomique avantage présente de toute la séquence mais prend beaucoup de place et nécessite la maturation de l’ARN pour être exprimer ce se ne font pas les bactéries !
2) ADN codan -> plus petite séquence et peut être exprimer par les cellule eucaryote

Question 4

Qu’elle sont les deux types de cellule hôte et leur avantage inconvénient ?

Answer 4

1) cellule procarytes (bacterie)
La multiplication et rapide, facile à manier et peu coûteux.
Mais pas capable de lire les promoteur eucaryote, ni de réaliser des excision épissage ou des modification post traditionnel

2) la cellule eucaryote
Peu exprimer des promoteur, réalise la maturation de l’ARN et des modification post traductionelle

Question 5

Comment savoir si l’insert est présent ? (Différentier les phagique des plasmidique)

Et si l’insert l’est ?

Answer 5

1) pour le vecteur
- phagique les cellules détruites contiennent le vecteur
- plasmidique survie à un médicament (l’insert permet la résistance au dis médicament )

2) via changement de coloration (car l’insert et placer dans le gène lactose si il est exprimer l’insert n’est pas présent)
Bleu -> échec
Incolore -> réussite