Immunothérapie

Question 1

Qu’est-ce qu’un Ac monoclonal?

Answer 1

Ac qui reconnait une seule cible impliquée dans une pathologie et qu’on fait exprimer en grande quantité in vivo

Question 2

Par quelle méthode est-il possible de générer de nombreux Ac monoclonaux?

Answer 2

Méthode des hybridomes

Question 3

Décrire la méthode des hybridomes.

Answer 3

1 - immunisation : injection d’Ag à une souris : elle produit des Ac en grande qté dans sa rate
2 - Prélèvement de la rate : on récupère les lymphocytes B (durée de vie limitée)
3 - En parallèle, culture de cellules de myélome (cancer du sang) : cellules sont HPRT (-/-) (ne produisent pas d’HPRT)
4 - Fusion cellulaire
5 - Amplification des clones sélectionnés sur milieu de culture
6A - Réinjection cellules B dans souris pour qu’elles produisent des Ac
6B - Production d’Ac in vitro

Question 4

Quels sont les 3 résultats possibles lorsqu’on fait la fusion cellulaire dans la méthode des hybridomes?

Answer 4

1 - lymphocytes B fusionnent ensemble : mort des cellules fusionnées
2 - Fusion cellule B et cellule myélomateuse : fusion rend cellule immortelle : expansion clonale des cellules hybrides
3 - Fusion de 2 cellules myélomateuses : mort des cellules en présence d’aminopterine (car HPRT -)

Question 5

À quoi sert la liaison d’un Ac monoclonal à un agent thérapeutique?

Answer 5

Permet de diriger un agent thérapeutique vers une cible en utilisant le pouvoir de ciblage de l’Ac (puisqu’il est spécifique à sa cible!)

Question 6

Qu’est-ce qu’un Ac monoclonal chimérique? Comment l’obtient-on?

Answer 6

Ac à 70% humain et 30% murin
1 - Générer un monoclonal par technique habituelle
2 - Obtenir séquence de région variable (environ 30% de l’Ac) -> PCR avec amorces flanquantes
3 - Combiner les régions variables avec les régions constantes d’un Ac humain et cloner dans des vecteurs d’expression pour faire exprimer l’Ac dans B en culture

Question 7

Qu’est-ce qu’un Ac monoclonal humanisé? Comment l’obtient-on?

Answer 7

Ac 95% humain et 5% murin
1 - Générer Ac par technique habituelle
2 - obtenir séquence des régions hypervariables (CDR1 à 3)
3 - combiner ces régions avec structure d’un Ac humain et cloner dans des vecteurs d’expression pour faire exprimer Ac dans B en culture

Question 8

Que veut dire «xi» dans le nom d’un Ac thérapeutique?

Answer 8

Chimérique

Question 9

Que veut dire «zu» dans le nom d’un Ac thérapeutique?

Answer 9

humanisé

Question 10

Que veut dire «mab» dans le nom d’un Ac thérapeutique?

Answer 10

Anticorps monoclonal

Question 11

Que veut dire «xizu» dans le nom d’un Ac thérapeutique?

Answer 11

Anticorps humanisé obtenu à partir d’un Ac qui était chimérique

Question 12

Que veut dire «u» dans le nom d’un Ac thérapeutique?

Answer 12

Ac humain

Question 13

Les anticorps thérapeutiques sont-ils les seuls immunoglobulines à potentiel thérapeutique?

Answer 13

Non, il y a aussi les hclgG de chameau (Ac à chaîne lourde uniquement) : mutation qui fait qu’un partie de la chaîne lourde est perdue, donc la chaîne légère ne peut pas s’associer
et IgNAR de requin (Ac à chaîne lourde très longs)

Question 14

Qu’est-ce que l’ipilimumab (un Ac monoclonal) inhibe?

Answer 14

AC anti-CTLA-4 inhibe interaction avec B7

Question 15

Quel est l’effet de l’ipilimumab?

Answer 15

Empêche l’arrêt de la stimulation des lymphocytes T

Question 16

Que fait le nivolumab?

Answer 16

Bloque signal PDL1 sur APC –> PDL1 a fonction inhibitrice, donc nivolumab empêche inhibition

Question 17

Qu’est-ce qui est particulier avec PDL1?

Answer 17

Exprimé dans 40-50% des mélanomes, mais peu dans les cellules saines

Question 18

Que cible le pembrolizumab?

Answer 18

Cible PD1 sur lymphocytes T : T deviennent désactivables moins facilement

Question 19

Quel est le nom thérapeutique de l’herceptine?

Answer 19

trastuzumab

Question 20

Que vise l’herceptine (trastuzumab)?

Answer 20

Vise la signalisation pro-mitotique médiée par HER-2

Question 21

Qu’est-ce qui est particulier avec HER-2?

Answer 21

Amplifié (surexprimé) dans 20-30% des cancers du sein

Question 22

Donner une façon de diriger un agent biologiquement actif vers un site précis.

Answer 22

En le conjuguant avec un Ac monoclonal

Question 23

Qu’est-ce qu’un CAR-T(chimeric antigen receptor -T lymhocyte)?

Answer 23

TCR chimérique issus du génie génétique
“TCR crinqué” comme dit Benoît
Récepteur conçu par génie génétique et dont le gène sera exprimé dans des lymphocytes transformés
CAR-T est transmembranaire

Question 24

Que contient un CAR-T à l’extérieur de la cellule?

Answer 24

régions variables de la chaîne légère et de la chaîne lourde d’un anticorps spécifique contre un antigène donné (ex d’Ag : CD19 sur B : cible pour traitement de la leucémie)

Question 25

Que contient le CAR-T dans sa région cytosolique?

Answer 25

Domaines de co-stimulation, incluant ceux de la chaîne zeta et du co-récepteur CD28, qui d’habitude contacte B7

Question 26

Le CAR-T dépend-il d’un CMH ou de la présence de B7 sur une APC?

Answer 26

Non, car il possède tous les domaines rassemblés ensemble (chaîne zeta et du co-récepteur CD28) : il peut activer T dès qu’il entre en contact avec sa cible

Question 27

Qu’est-ce qu’un choc septique?

Answer 27

Hypotension : causée par infection systémique
Grande libération de TNFalpha : inflammation et vasodilatation + perméabilité capillaire
Dilatation ventriculaire et dysfonctionnement cardiaque

Question 28

Qu’est-ce qu’un choc anaphylactique?

Answer 28

Réaction allergique sévère

Dégranulation massive des mastocytes, inflammation et gonflement des tissus : étranglement des voies respiratoires.

Question 29

Qu’est-ce que le syndrôme du choc toxique?

Answer 29

Réaction à une toxine bactérienne (ex : superantigène TSST-1 de strep. aureus)
IL-1, IL-2, TNFalpha et stimulation polyclonale des T
Fièvre élevée, hypotension et problèmes systémiques