HPLC

Question 1

O que é a HPLC (explicação do nome)?

Answer 1

A HPLC (high pressure liquid cromatography) é uma cromatografia de alta eficiência e pressão

Question 2

Caracteriza a HPLC.

Answer 2

A HPLC é uma cromatografia em coluna (forma física) de fase móvel líquida. É uma cromatografia de partição, ou seja, a retenção dos compostos dependem da solubilidade da fase estacionária e móvel e é considerada sólido-líquida. Nesta cromatografia há uma elevada pressão para forçar a passagem de uma amostra diluída num solvente orgânico através da coluna cromatográfica que possui a fase estacionária.

Question 3

Quais são os 2 tipos (fases) de HPLC que existem?

Answer 3

Existe a fase reversa e a fase normal. Na fase normal a fase estacionária é polar em relação ao solvente que é menos polar. Na fase reversa, a fase estacionária é apolar em relação ao solvente que é menos apolar.

Question 4

Quais são os constituintes da HPLC? Ou seja, quais são os principais componentes?

Answer 4

• Reservatório de fase móvel: garrafas com solventes utilizados para transportar a amostra.
• Injetor: dispositivo que introduz a amostra no sistema.
• Bomba cromatográfica: movimenta/bombeia a fase móvel por todo o sistema
• Coluna cromatográfica: preenchido com a fase estacionária.
• Detetor: identifica o tempo de retenção das substâncias analisadas.
• Software de operação (Dados): produz o cromatograma.
• Resíduos.

Question 5

Do que é constituída a coluna cromatográfica e porquê?

Answer 5

É constituída por aço inoxidável para aguentar as elevadas pressões.

Question 6

Como sabemos que tivemos uma boa e eficaz separação no cromatograma para identificação de compostos?

Answer 6

Os picos não podem ser sobrepostos, têm de ter uma separação uns dos outros e têm de haver boa definição nos picos.

Question 7

Quais são as características de um bom detetor?

Answer 7

• Elevada sensibilidade, seletividade e linearidade.
• Pouco sensível às variações de temperatura e fluxo.
• Ser preciso.
• Apresentar boa reprodutibilidade.

Question 8

Quais são as vantagens da HPLC? E as suas aplicações?

Answer 8

Vantagens:
- Técnica eficiente e eficiente
- Elevado poder de resolução
- Elevada sensibilidade

Aplicações:
- Indústria farmacêutica
- Análises clínicas