HISTO Flashcards
¿Cuales son los tipos de toma de muestras?
Biopsia
Necropsia
Frotis de celulas superficiales
Frotis de celulas sanguineas
Experimentacion en animales
¿Que significa que el metodo de estudiom sea IN VITRO?
Que las celulas observadas estan vivas y es en tiempo real
¿Que significa que el metodo de estudio sea POST-MORTEM?
Que las celulas observadas estan muertas, y requiere una serie de pasos para ser observada
Etapas para ver una muestra histologica
Fijacion
Deshidratacion
aclaramiento
infiltracion e inclusion
seccion o corte
coloracion
montaje
¿En que consiste el proceso de fijacion?
Consiste en evitar la autolisis de la muestra, se puede realizar a traves de 3 formas:
Perfusion (inyeccion)
Inmersion (Sumerge)
Vapores (gases)
Sustancias que ayudan:
Formaldehido 10%
¿En que consiste el proceso de aclaramiento?
Su proposito es hacer que la muestra sea miscible con la posterior sustancia en la cual se va estar inmerso (XILOL)
*Esta etapa se llama aclaramiento porque la muestra se vuelve transparente
¿En que consiste el proceso de deshidratacion?
Se deshidrata la muestra a traves de alcoholes crecientes
70 (30 min)
80 (45 min)
96 (45 min)
100 (60 min)
100 (60 min)
100 (60 min)
¿En que consiste el proceso de infiltración e inclusion?
Se introduce la muestra en un medio hidrofobo o hidrofilico, generalmente hidrofobo (parafina o paraplast).
Se forma un taco de parafina
¿Cual es el proposito de utilizar alcoholes crecientes en el proceso de Deshidratación?
Para evitar que la muestra se dañe o desforme con la rapida de deshidratación
¿Que significa que se haya formado un TACO?
Se le conoce como taco a la inclusion de la muestra en el medio hidrofobico (parafina)
¿En que consiste el proceso de Corte o seccion?
Primero se talla la muestra para eliminar el exceso de parafina.
luego Se realizan cortes de 5 a 10 micrones de espesor, para así de esta forma permitir que la luz pueda atravesar la muestra y pueda verse en el microscopio
¿En que consiste el proceso de coloración?
Antes de colorar la muestra se debe volver a hidratar la muestra, ya que los agentes de tincion son hidrofilicos y eliminar completamente la parafina.
Se vuelve a mezclar con XILOL para eliminar la parafina.
Luego se realiza el proceso inverso con alcoholes:
100
100
100
96
80
70
Luego puede ser teñido
(Los mas utilizados: Hematoxilina y eosina)
¿Cual es el aparato que permite cortar las muestras luego de la inclusion?
Microtomo
¿En que consiste el proceso de montaje?
Nuevamente se deshidrata la muestra con alcoholes
Se agrega XILOL
y finalmente se agreag al portaobjetos
¿Que es el mertex?
quimico utilizado para pegar la muestra al portaobjetos
¿Que es la Hematoxilina?
Es un agente de tinción de tipo Basico, Se adhiere a elementos acidos de la celula como:
Nucelolo
Nucleo
Mitocondrias
Y SE VEN AZULES
¿Que es la eosina?
Es un agente de tinción de tipo Acido y se adhiere a elementos basicos de la celula tiñendolos de color ROSA
¿Para que se utiliza la tincion de TOLUIDINA?
Para ver nucleos.
Tiñe todo AZUL
¿Para que se utiliza la tincion Acido periyodico?
Membrana basal y deteccion de carbohidratos
¿para que se utiliza la tincion de MASSON?
Principalmente para el tejido conjuntivo
¿Para que se utiliza la tincion de MALLORY?
Principalmente tejido conjuntivo
¿Para que se utiliza la tincion de HEMATOXILINA FERRICA?
Identifica fibras elasticas
¿A que se le conoce como artefactos en la tecnica histologica?
A los errores que pueden ocurrir al manipular la muestra
¿En que etapa ocurre mas comunmente el proceso de artefacto?
en la fijacion
Artefacto: Retraccion
Paso de alcoholes muy rapido o sobrecalentamineto con la parafina
Artefacto: Corte
Se forman pliegues O muescas
Artefacto: Sobrecoloracion
sobreexposicion a la coloracion
Artefacto: Precipitacion
El colorante (agente de tincion) está vencido
Artefacto: Burbujas
ocurre por mal montar la muestra
