Exercices - enzymes de modification de l'ADN Flashcards
Quelle est l’origine des enzymes de restriction?
Bactérienne
Endonucléase :
Enzyme qui coupe à l’intérieur de la chaîne d’ADN.
Exonucléase :
Enzyme qui coupe à partir des extrémités de la chaîne d’ADN.
Qu’est-ce qu’un palindrome?
Une séquence de nucléotides identiques de 5’ en 3’ sur les deux brins.
Que sont les isoschizomères?
Deux enzymes différentes qui reconnaissent le même site de restriction.
Qu’est-ce que l’activité étoile?
Phénomène par lequel une enzyme de restriction, dans des conditions non optimales, effectuera des digestions de l’ADN à des sites différents de son site de reconnaissance normal (non spécifique).
Quelle précaution est essentielle avec les enzymes de restriction en biologie moléculaire?
Manipulation sur glace.
Comment agis la ligase sur deux brins d’ADN digérés par une enzyme de restriction?
Elle reconstitue la liaison phosphodiester entre le groupement phosphate d’un carbone 5’ et le groupement hydroxyle d’un carbone 3’ de deux nucléotides adjacents des brins d’ADN.
À quoi sert la phosphorylation de l’ADN en biologie moléculaire?
Elle permet le marquage radioactif de l’ADN grâce à la polynucléotide kinase du phage 4.
À quoi sert la déphosphorylation de l’ADN en biologie moléculaire?
Elle prévient la légation d’ADN au cours de constructions de molécules d’ADN.
Quelle est l’enzyme utilisée lors de la phosphorylation ou la déphosphorylation?
Polynucléotide kinase du phage 4.
Quelle est l’utilité du magnésium dans certains tampons de réaction en biologie moléculaire?
Il agit comme cofacteur des enzymes de restriction.
À quoi peut-on généralement attribuer une digestion enzymatique incomplète?
Mauvais entreposage de l'enzyme Mauvais tampon Temps de digestion trop court Impuretés dans l'ADN Température de digestion incorrecte
En quoi le glycérol peut-il influencer l’activité de l’enzyme de restriction?
Il inhibe l’activité spécifique de l’enzyme de restriction.
Comment peut-on remédier à l’influence du glycérol?
En s’assurant que le volume d’enzymes ne dépasse pas 1/10 du volume total de réaction.
