Cytologi

Question 1

Vilka två typer av provtagningmetoder finns? (översiktligt)

Answer 1

• Exfoliativ cytologi: celler som lossnar naturligt från slemhinnor/epitel
• Aspirationscytologi: utsugning av vätska

Question 2

Tre typer av exfoliativ cytologi

Answer 2

• Skrapning
• Borstning
• Sköljning

Question 3

Fyra typer av aspirationscytologi

Answer 3

• Finnålsaspiration (FNA)

- Exsudat

Question 4

Vad är ROSE?

Answer 4

Rapid OnSite Evaluation. Morfologisk bedömning på plats, samt en uppskattning av adekvar cellmaterial. T.ex. endoskopiskt ultraljud (EUS)

Question 5

Vad är exsudat?

Answer 5

Vätskor, celler eller cellprodukter som långsamt utsöndras från blodkärl från oftast inflammerade vävnader. Proteinrikt och grumligt

Question 6

Skillnad mellan exsudat och transudat

Answer 6

Transudat är ett resultat av obalanserat hydrostatiskt och osmotiskt tryck. Transudat har en lägre proteinhalt och är ett cellfattigt provmaterial. Provvätskan är tunnflytande och genomskinlig

Question 7

Hur fixeras färska vätskor när de kommer in till cytologen?

Answer 7

Det görs utstryk på glas. Provet får där lufttorka

Question 8

Vad är cytoloyt?

Answer 8

Transport/förvaringsmedium.

• Lyserar erytrocyter
• Förebygger proteinutfällning
• Löser upp mucus

Question 9

Är det bra att förvara provet i cytolyt? varför/varför inte? Finns det något annat?

Answer 9

Om provet ska förvaras under en längre tid (>8 dagar) är cytolyt inte ett bra förvaringsmedium. Preservcyt har en högre alkoholhalt, och förvarar därmed provet bättre.

Question 10

Vilka prepareringsmetoder finns, och när används de?

Answer 10

- Vätskebaserad cytologi:
gynprover, gallgångar, sköljvätskor
- Cytospin/Megafunnel (centrifugering):
BAL (diffräkning)
- Utstryk:
Exsudat
- Membranfiltrering:
Bronkialsköljvätska
- Cellblock:
Immunbeställningar

Question 11

När används thinprep och hur fungerar det?

Answer 11

Thinprep används vid vätskebaserad cytologi. Det är en automatiserad preparering, där vätskan filtreras bort, och kvar på filtret blir ett monolager med celler som överförs till objektglas med imprint.

Question 12

Vad kan behöva göras med ett prov före thinprep-maskinen om det är blodigt?

Answer 12

Då tillsätts ättika och cytolyt (1:1) till cellprover fixerade i preservcyt. Provet centrifugeras och supernatanten hälls av. Sedan resuspenderas pelleten med preservcyt.

Question 13

Vad är nackdelen med att centrifugera ett prov före thinprep?

Answer 13

Cellens morfologi kan bli påverkade av lyseringen. Dock tvättas erytrocyter bort, vilket gör diagnostiken lättare

Question 14

Vad är konventionell cytologi, och hur fungerar det?

För- och nackdelar

Answer 14

Vid konventionell cytologi gör barnmorskan utstryk direkt på objektglas. Celler tas från tre områden (vagina, portio och cervix), och placeras på samma objektglas i olika figurer (för att särskilja)
Fördel: om cellförändringar finns kan man direkt se vid vilket område förändringarna finns
Nackdel: jobbiga att mikroskopera och sätta diagnos på, då man inte får monolager av celler. Går inte heller att köra vidareanalyser.

Question 15

Hur tas utstryk?

Answer 15

Utstryk tas på alla färska prover som kommer in.
Cellmaterialet överförs till centrifugeringsrör. Efter centrifugering hälls supernatanten av, och cellmaterial för utstryk tas från pelleten. Utstryk lufttorkas som fixering

Question 16

Varför är det viktigt att man inte centrifugerar prover man ska ha till utstryk med för hög hastighet?

Answer 16

Eftersom provet man ska ta tas från pelleten, är det väldigt viktigt att denna inte är för hård för att kunna få ett prov från

Question 17

Hur fungerar membranfiltrering?

För- och nackdelar

Answer 17

Membranfiltrering påminner om thinprep, med den största skillnaden att filtret följer med och ska färgas.
Fördelar: ger en väldigt bra cellbild med god morfologi
Nackdelar: ger inget monolager

Question 18

Hur fungerar Cillient?

Answer 18

Är ett automatiserat cellblockssystem

• Celler paraffinbäddas
• Baseras på thinprep-teknik och använder medierna cytolyt och preservcyt
• Vakumassisterad filtrering
  1. Prov, pipetter och kassetter laddas ->
  2. Provet filtreras med hjälp av vakuum
  2a) filtrering med isopropanol (för dehydrering) + eosinfärgning
  2b) filtrering med xylen för borttagning av alkohol
  3. Celler bäddas -> paraffincylinder
  4. Ännu ett lager med paraffin -> bäddenhet
  5. Snittning

Question 19

Hur fungerar cellblock?

Answer 19

• Celler i suspension centrifugeras ner till en pellet
• Pelleten dehydreras och prepareras till en paraffinkloss
• Snittning
• Immunocytokemi

Question 20

Vilka rutinfärgningar används på cytologen?

Answer 20

• May-Grünewald Giemsa (MGG)
• Papanicolaou (PAP)
• Diffquick (DQ)

Question 21

Specialfärger/önskemål som används på cytologen?

Answer 21

• Immunocytokemi
• Hematoxylin - Eosin
• Oilred (lipidindex)

Question 22

När används May-Grünewald Giemsa?

Answer 22

Rutinfärgning för färska, lufttorkade cytologiska preparat. Används även vid punktionscytologi för diffräkning

Question 23

Vad färgas vid användning av May-Grünewald Giemsa?

Answer 23

Cellkärna - > röd-violett
Cytoplasma -> ljusblå, blå-rosa
Erytrocyter -> rosa
Man kan urskilja signifikante förändringar i kärnans storlek, färg och form, och även kärn- och cytoplasmaförhållande.

Question 24

May Grünewald består av

Answer 24

Eosin, metylenblått och metanol

Question 25

Giemsa består av

Answer 25

Azur B, Eosin Y, glycerin och metanol

Question 26

Vad gör Metylenblått och Azur B?

Answer 26

Båda är basiska färgämnen -> positivt laddade

De färgar DNA och RNA i cellens kärna.

Question 27

Vad gör Eosin?

Answer 27

Eosin är surt färgämne -> negativt laddat.

Färgar cytoplasma i en rosa-blå ton

Question 28

När används Papanicolaou?

Answer 28

Är rutinfärgning vid spritfixerade cytologiska preparat. Används för att färga bl.a. gyncytologiska preparat, sputum, borst- och sköljprover från bronker och olika sorters kroppsvätskor, för att verifiera cellernas morfologiska status, som t.ex. malignitet och inflammation

Question 29

Hur ser PAP-färgning ut?

Answer 29

PAP-färgning ger ett väl infärgat kromatin, en differentierad plasmafärg och cytoplasma-genomsynlighet.
Utförs på våtfixerat material

Question 30

Vad består PAP av?

Answer 30

Kärnfärg - Harris Hematoxylin

Cytoplasmafärg - EA50 (Eosin + light green, & OG6 (orange 6))

Question 31

Vad gör Hematoxylin vid PAP?

Answer 31

Hematinet (hematoxylins aktiva komponent) färgar både DNA och RNA blått i cellernas kärna och i cytoplasma

Question 32

Vad gör OG6 vid PAP?

Answer 32

Färgar keratiniserat epitel lysande orange. Även erytrocyter och HPV-infekterade celler färgas

Question 33

Vad gör Eosin vid PAP?

Answer 33

Färgar cytoplasma hos skivepitelets ytceller, nukleoler, erytrocyter och cilier

Question 34

Vad gör light green vid PAP?

Answer 34

Färgar metaboliskt aktiva celler