Cytologi Flashcards
Vilka två typer av provtagningmetoder finns? (översiktligt)
- Exfoliativ cytologi: celler som lossnar naturligt från slemhinnor/epitel
- Aspirationscytologi: utsugning av vätska
Tre typer av exfoliativ cytologi
- Skrapning
- Borstning
- Sköljning
Fyra typer av aspirationscytologi
- Finnålsaspiration (FNA)
- Exsudat
Vad är ROSE?
Rapid OnSite Evaluation. Morfologisk bedömning på plats, samt en uppskattning av adekvar cellmaterial. T.ex. endoskopiskt ultraljud (EUS)
Vad är exsudat?
Vätskor, celler eller cellprodukter som långsamt utsöndras från blodkärl från oftast inflammerade vävnader. Proteinrikt och grumligt
Skillnad mellan exsudat och transudat
Transudat är ett resultat av obalanserat hydrostatiskt och osmotiskt tryck. Transudat har en lägre proteinhalt och är ett cellfattigt provmaterial. Provvätskan är tunnflytande och genomskinlig
Hur fixeras färska vätskor när de kommer in till cytologen?
Det görs utstryk på glas. Provet får där lufttorka
Vad är cytoloyt?
Transport/förvaringsmedium.
- Lyserar erytrocyter
- Förebygger proteinutfällning
- Löser upp mucus
Är det bra att förvara provet i cytolyt? varför/varför inte? Finns det något annat?
Om provet ska förvaras under en längre tid (>8 dagar) är cytolyt inte ett bra förvaringsmedium. Preservcyt har en högre alkoholhalt, och förvarar därmed provet bättre.
Vilka prepareringsmetoder finns, och när används de?
- Vätskebaserad cytologi: gynprover, gallgångar, sköljvätskor - Cytospin/Megafunnel (centrifugering): BAL (diffräkning) - Utstryk: Exsudat - Membranfiltrering: Bronkialsköljvätska - Cellblock: Immunbeställningar
När används thinprep och hur fungerar det?
Thinprep används vid vätskebaserad cytologi. Det är en automatiserad preparering, där vätskan filtreras bort, och kvar på filtret blir ett monolager med celler som överförs till objektglas med imprint.
Vad kan behöva göras med ett prov före thinprep-maskinen om det är blodigt?
Då tillsätts ättika och cytolyt (1:1) till cellprover fixerade i preservcyt. Provet centrifugeras och supernatanten hälls av. Sedan resuspenderas pelleten med preservcyt.
Vad är nackdelen med att centrifugera ett prov före thinprep?
Cellens morfologi kan bli påverkade av lyseringen. Dock tvättas erytrocyter bort, vilket gör diagnostiken lättare
Vad är konventionell cytologi, och hur fungerar det?
För- och nackdelar
Vid konventionell cytologi gör barnmorskan utstryk direkt på objektglas. Celler tas från tre områden (vagina, portio och cervix), och placeras på samma objektglas i olika figurer (för att särskilja)
Fördel: om cellförändringar finns kan man direkt se vid vilket område förändringarna finns
Nackdel: jobbiga att mikroskopera och sätta diagnos på, då man inte får monolager av celler. Går inte heller att köra vidareanalyser.
Hur tas utstryk?
Utstryk tas på alla färska prover som kommer in.
Cellmaterialet överförs till centrifugeringsrör. Efter centrifugering hälls supernatanten av, och cellmaterial för utstryk tas från pelleten. Utstryk lufttorkas som fixering
Varför är det viktigt att man inte centrifugerar prover man ska ha till utstryk med för hög hastighet?
Eftersom provet man ska ta tas från pelleten, är det väldigt viktigt att denna inte är för hård för att kunna få ett prov från
Hur fungerar membranfiltrering?
För- och nackdelar
Membranfiltrering påminner om thinprep, med den största skillnaden att filtret följer med och ska färgas.
Fördelar: ger en väldigt bra cellbild med god morfologi
Nackdelar: ger inget monolager
Hur fungerar Cillient?
Är ett automatiserat cellblockssystem
- Celler paraffinbäddas
- Baseras på thinprep-teknik och använder medierna cytolyt och preservcyt
- Vakumassisterad filtrering
1. Prov, pipetter och kassetter laddas ->
2. Provet filtreras med hjälp av vakuum
2a) filtrering med isopropanol (för dehydrering) + eosinfärgning
2b) filtrering med xylen för borttagning av alkohol
3. Celler bäddas -> paraffincylinder
4. Ännu ett lager med paraffin -> bäddenhet
5. Snittning
Hur fungerar cellblock?
- Celler i suspension centrifugeras ner till en pellet
- Pelleten dehydreras och prepareras till en paraffinkloss
- Snittning
- Immunocytokemi
Vilka rutinfärgningar används på cytologen?
- May-Grünewald Giemsa (MGG)
- Papanicolaou (PAP)
- Diffquick (DQ)
Specialfärger/önskemål som används på cytologen?
- Immunocytokemi
- Hematoxylin - Eosin
- Oilred (lipidindex)
När används May-Grünewald Giemsa?
Rutinfärgning för färska, lufttorkade cytologiska preparat. Används även vid punktionscytologi för diffräkning
Vad färgas vid användning av May-Grünewald Giemsa?
Cellkärna - > röd-violett
Cytoplasma -> ljusblå, blå-rosa
Erytrocyter -> rosa
Man kan urskilja signifikante förändringar i kärnans storlek, färg och form, och även kärn- och cytoplasmaförhållande.
May Grünewald består av
Eosin, metylenblått och metanol
Giemsa består av
Azur B, Eosin Y, glycerin och metanol
Vad gör Metylenblått och Azur B?
Båda är basiska färgämnen -> positivt laddade
De färgar DNA och RNA i cellens kärna.
Vad gör Eosin?
Eosin är surt färgämne -> negativt laddat.
Färgar cytoplasma i en rosa-blå ton
När används Papanicolaou?
Är rutinfärgning vid spritfixerade cytologiska preparat. Används för att färga bl.a. gyncytologiska preparat, sputum, borst- och sköljprover från bronker och olika sorters kroppsvätskor, för att verifiera cellernas morfologiska status, som t.ex. malignitet och inflammation
Hur ser PAP-färgning ut?
PAP-färgning ger ett väl infärgat kromatin, en differentierad plasmafärg och cytoplasma-genomsynlighet.
Utförs på våtfixerat material
Vad består PAP av?
Kärnfärg - Harris Hematoxylin
Cytoplasmafärg - EA50 (Eosin + light green, & OG6 (orange 6))
Vad gör Hematoxylin vid PAP?
Hematinet (hematoxylins aktiva komponent) färgar både DNA och RNA blått i cellernas kärna och i cytoplasma
Vad gör OG6 vid PAP?
Färgar keratiniserat epitel lysande orange. Även erytrocyter och HPV-infekterade celler färgas
Vad gör Eosin vid PAP?
Färgar cytoplasma hos skivepitelets ytceller, nukleoler, erytrocyter och cilier
Vad gör light green vid PAP?
Färgar metaboliskt aktiva celler
