cours 3 : variabilité des Ac Flashcards
quelles sont les 4 causes de la variabilité des Ac
- séquences génétiques multiples et diversifiées
- recombinaisons somatiques et appariements variables
- appariement multiples des chaînes H et L
- mutations somatiques
quels sont les chromosomes codant pour les régions variables ?
- chr 2 (isotype kappa) et 22 (isotype lambda) pour les chaînes légères
- chr 14 pour les chaînes lourdes
quel est le motif reconnu par les enzymes de clivages ligation ? Quelles sont ces enzymes
formation d’un heptamère (palindrome) puis d’une boucle asymétriqe (23-12) et enfin un nonamère (palindrome).
les enzymes sont RAG 1 et RAG2
spécificité des domaines variables des chaînes lourdes ?
Il y a une séquence D ce qui permet de générer une diversité encore plus importante + ajout de séquences aléatoires de nucléotides
isotypie
épitopes des Ac antigéniques d’une espèce à l’autre
= concerne les domaines constants des chaînes L ou H
allotypie
épitopes des Ac antigéniques dans une sous-population d’une espèce donnée
= concerne les régions constantes des chaînes L ou H (Ck)
idiotypie
épitopes des Ac antigéniques au sein d’un seul individu
= concerne les régions hypervariables des chaînes L ou H
schéma des réponses primaires et secondaires à un Ag
schéma 3
comment obtenir des Ac polyclonaux ?
- immunisation d’un animal
- après 2 à 5 semaines, on fait une deuxième ou une troisième immunisation
- après 2 à 5 semaines on prélève du sérum = sérum immun
- on peut ensuite purifier le sérum pour obtenir les ac polyclonaux
comment obtenir des Ac monoclonaux ?
- immunisation d’un animal
- après 2 à 5 semaines, on fait une deuxième ou une troisième immunisation
- après 2 à 5 semaines on tue l’animal, on prélève la rate et les ganglions (lymphocytes B)
- fusion avec des myélomes puis fusion des membranes pour obtenir un hybridomes
sélection des hybridomes dans un milieu sélectif
avantages des Ac polyconaux (5pts)
- simple à obtenir
- peu onéreux
- production limitée et non pérenne
- permet immuno-précipitation
- intéraction Ag/Ac difficile à caractériser
avantages des Ac monoclonaux (4pts)
- obtention plus difficile
- production pérenne et massive
- caractérisation moléculaire fine
- pas immuno-précipitation
Quelle est l’ordre des séquences recombinés
LVJCk (ou Clambda) pour les chaînes légères
LVDJC pour les chaînes lourdes