Cours 2 Flashcards
Qu’est-ce qu’une réaction croisée du dépistage immunoenzymatique.
Ce produit lorsque des substances d’une même famille (ou d’une
famille différente) que la molécule dépistée, mais ayant une
structure analogue, donne des résultats faux positifs.
• Plusieurs anticorps pour un même antigène
• La pseudoéphédrine, ingrédient courant dans les médicaments
contre la toux, peut réagir dans les immuno-essais comme
l’amphétamine
La haute probabilité de faire face à des réactions croisées démontre
la nécessité de développer une démarche de confirmation
(deuxième méthode d’analyse) d’un résultat positif obtenu par une
technique immunologique.
Donnez les caractéristiques de la confirmation quantitative-GC (composantes de l’appareil)
Gaz Vecteur: Gaz qui circule à l’intérieur du chromatographe, entraînant les analytes à travers
la colonne, depuis l’injecteur jusqu’au détecteur. Son choix dépend du type de
détecteur utilisé (hélium, azote, argon ou hydrogène. Le débit du gaz vecteur
influe sur le pouvoir de résolution du chromatographe
Système d’injection: Ce système permet l’introduction de l’échantillon dans la colonne du
chromatographe, ainsi que la volatilisation des analytes. La To de
l’injecteur est réglée de manière à entraîner la vaporisation de tous les
analytes de l’échantillon et généralement 50°C au-dessus de la
température d’ébullition de l’analyte le moins volatile.
Four: Plus la température du four (et donc de la colonne) est élevée, plus les analytes se
déplacent rapidement dans la colonne, mais moins ils interagissent avec la phase
stationnaire, et donc moins les analytes sont séparés.
Plus la température du four est basse, meilleure est la séparation des analytes mais
plus longue est l’analyse.
Le choix de la température est donc un compromis entre la durée de l’analyse et le
niveau de séparation désiré.
Colonne : Il existe deux types de colonnes : les colonnes remplies et les colonnes
capillaires. Ces colonnes ont un diamètre de quelques millimètres et une
longueur de l’ordre du mètre (20 à 50 mètres), sur laquelle les différentes
molécules de l’échantillon injecté vont se séparer selon leurs affinités avec
la phase stationnaire.
Une colonne capillaire de faible diamètre, longue, présentant une phase
stationnaire épaisse et ayant des propriétés chimiques similaires aux molécules
de l’échantillon permet typiquement d’obtenir de meilleures séparations.
Une méthode pour laquelle la température est gardée constante tout au long de
l’analyse est appelée « isotherme ». À l’inverse, on peut choisir d’augmenter la
température du four au cours de l’analyse : cette méthode est appelée
« gradient ».
Système de détection : Mesure le signal émis par les différentes molécules et
permet de les identifier. Nécessite des logiciels
performants. (FID,TCD,MS)
Système régulateur : Nécessaires pour les gaz utilisés (hélium, dihydrogène,
diazote et air comprimé). Ces gaz peuvent être purifiés par
des cartouches filtrantes.
Donnez les avantages/désavantage de la confirmation quantitative-LC.
Avantages
• La dérivation n’est souvent pas nécessaire, mais peut être une option
• Plusieurs types de colonnes chromatographiques disponibles
• Temps d’analyse plus court que la GC-MS
Désavantages
• Souvent moins sensible que la GC-MS (dilution vs concentration)
• Conditions analytiques variables et comparaisons interinstruments et
interlaboratoires difficiles
• Développement analytique ardu et moins connu
Donnez des caractéristiques de la confirmation quantitative-MS par rapport aux métabolites.
Discussion: La quantification des métabolites
Idéalement, tous les métabolites détectables par la technologie utilisée
devraient être quantifiés. (actifs et non actifs)
Une faible concentration en molécule mère chez un individu ne doit pas être
faussement interprétée comme une non-intoxication. (médicament de courte
demi-vie)
On peut également voir si la métabolisation de la molécule s’est déroulée
correctement ou s’il y a eu saturation. (AAS, acétaminophène)
La quantification des métabolites peut donner une idée de la concentration de
molécule mère ayant été consommée
Comment se fait la préparation d’un échantillon avant la détection?
Une bonne préparation de l’échantillon influera directement sur la
limite de détection, la répétabilité (même instrument, même résultat,
même technicien) et la reproductibilité (même instrument, même
résultat, technicien différent) de l’analyse.
La multitude de matrices à traiter nécessite l'emploi de techniques variées plus ou moins complexes : • Filtration • Précipitation • Dialyse • Extraction liquide – liquide • Extraction solide-solide
Donnez des caractéristiques d’une interaction médicamenteuse qui agit sur le métabolisme (inhibition enzymatique).
• Constitue l’interaction la plus commune et la plus importante.
• Un xénobiotique peut inhiber une CYP, qu’elle soit un ligand de cette CYP
ou non.
• Si on est en présence de deux médicaments qui sont métabolisés par la
même CYP, la rapidité de ce métabolisme risque d’être grandement
altérée.
• Ex. Érythromycine et Midazolam sont métabolisés CYP3A4. Le
métabolisme du midazolam est pratiquement complètement inhibé, car
son affinité pour cette CYP est moins grande.
• Conséquences?
• Midazolam: anxiolytique, amnésiant, hypnotique, anticonvulsant,
sédatif et myorelaxant
• D’autres médicaments comme les fluoroquinolones, les antifongiques
azolés, les antimicrobiens macrolides, la fluoxétine, la lidocaïne et
l’amiodarone ne sont pas métabolisés par le CYP3A4, mais peuvent
inhiber l’activité de cet isoenzyme de façon réversible.
• Le CYP3A4 est la voie de métabolisation la plus importante des
médicaments et des drogues. Son inhibition peut avoir de bonnes
conséquences.
Donnez des caractéristiques d’une interaction médicamenteuse qui agit sur le métabolisme (INDUCTION enzymatique).
• L’activité enzymatique peut également être augmentée par des
xénobiotiques. Le phénomène d’induction est plus rare que celui
d’inhibition, mais il reste non négligeable.
• L’activation de la transcription enzymatique (augmentation du nombre
d’enzymes CYP) par un xénobiotique est le mécanisme d’action le plus
commun.
• En général, ce même xénobiotique n’était pas un substrat à métaboliser
par cet isoenzyme.
Le métabolisme de tous les xénobiotiques normalement métabolisés par
l’isoenzyme induite sera altéré.
• Le métabolisme sera plus rapide et l’intensité et la durée de l’effet
seront diminuées.
• La carbamazépine fait de l’auto-induction puisqu’elle favorise la
transcription des CYP 3A. Cette même isoenzyme métabolise également
la carbamazépine.
• Dans les cas où un médicament consommé est une prodrogue ou encore
une molécule active générant des métabolites actifs, l’effet de la molécule
active ainsi que son potentiel toxique sera augmentée.
• Ex. codéine métabolisée en morphine par la CYP 2D6
Comment on identifie des drogues/médicaments inconnus (métabolites)?
• Certains logiciels sont conçus pour rechercher des métabolites en fonction d’une
molécule mère préétablie, identifiée ou non.
• On cherche, dans une chromatographie d’un échantillon, des masses de molécules
correspondant à la métabolisation de la molécule mère.
- Utile lorsque le métabolisme d’une molécule est peu connu
- Métabolisation croisée (Norfentanyl)
- Recherche inversée?
- ID une molécule mère selon métabolites détectés
Donnez les traitements pharmacologiques aux cannabinoïdes.
Les benzodiazépines, telles que le lorazépam 1-2mg IV, doivent être administrées
selon les besoins pour
• hallucinations, l’irritabilité, l’agitation, l’anxiété, crises d’épilepsies et convulsions.
Les antiémétiques tels que l’ondansétron 4-8 mg IV peuvent être administrés selon
les besoins pour
• Nausées,vomissements et hyperémèse.
Les neuroleptiques tels que l’olanzapine 10-40 mg IM peuvent être administrés
selon les besoins pour
• Psychose et agitation
Dans la majorité des patients, les effets cliniques se résolvent dans les 8 heures.
L’observation aux urgences est recommandée jusqu’à ce que le patient démontre une
amélioration clinique.
