Chemikalien des Praktikums Flashcards
D-Desthiobiotin
Biotin-Derivat, welches für die Elution von Proteinen verwendet wird, die mit einem StrepII-Tag an das Strep-Tactin einer Säule gebunden sind
Eingestzt bei der Affinitätschromatographie der Chitosanase
Benzoase
Baut nach dem Aufschluss der Zellen Nukleinsäuren ab
High-Salt-Puffer
Diente der Stabilisierung der Chitosanase
Zugegeben vor der Ultraschall-Behandlung der Zellfragmente
Coomassie Brilliant Blue
- Bindet an die kationischen und aromatischen Seitenketten von Proteinen
- Bildet dabei einen blauen Komplex der bei 595 nm absorbiert
- Eingesetzt bei dem Bardford-Assay und der SDS-PAGE
Acrylamid / Bisacrylamid
Das Polymer von Acrylamid (=Polyacrylamid) dient als Matrix für alle im Praktikum verwendeten Gele
Ammoniumpersulfat (APS)
Erzeugt bei Reaktion mit Acrylamid Acrylamid-Radikale und dient so der Polymeriserung der Acrylamid-Radikale
Tetramethylethylendiamin (TEMED)
Erleichtert die Radikal-Bildung des Ammoniumpersulfats (APS)
Calcufluor
- unspezifische Färbung von beta-1,4-glykosidischen Bindungen
- Verwendet beim Dotblot und Aktivitätsgel
Triton
- Entfernt SDS von Proteinen
- Verwednet bei Aktivitätsgel (Semi-nativen-PAGE)
Blocking-Puffer (Milchpulver)
- Die Membran des Western-Blots wurd darin inkubiert, bevor das Strep-Taction auf die Membran gegeben wurde
- Hat alle Stellen auf der Membran, die nicht bereits mit der Chitosanase besetzt waren, mit Proteinen besetzt, sodass das Strep-Tactin nicht unspeziefisch an die Membran bindne konnte
Bestandteile der Chemiluminisenzlösung, die beim Wester-Blot eingesetzt wurde, und deren Funktion
- Luminol
- Wird durch Peroxidase oxidiert, wobei Licht immitiert wird
- H2O2
- Katalysator der Luminol-Oxidation
- Sauerstoff-Donor für die Luminol-Oxidation
- Cumarsäure
- Verbessert die Reaktionsbedingungen
SDS (Natriumdodecylsulfat)
- Linearisiert Proteine, indem es die Quatär- und Tertiärstruktur der Proteine zerstört
- Trägt eine negative Ladung, sodas alle Proteine eine negative Ladung aufweisen und die selbe Ladungsdichte zeigen
- –> Ermöglicht eine Auftrennung die Ausschließlich auf der Größe der Proteine basiert
beta-Mercaptoethanol
- Reduziert Cystein-Reste bzw. Disulfid-Brücken
- Hilft der Entfaltung von Proteinen
- Verwendet bei der SDS-PAGE und Western-Blot
Ammoniumbisulfat
- Färbt Zucker beim karamellisieren dunkelbraun an
- Verwendet bei der Visulasierung von Chitosanen bei der TLC
Ameisensäure
- Liefert Protonen bei der Ionisierung mittels ESI
