Chapitre 5 Flashcards
Quelles sont les propriétés physico-chimiques des acides nucléiques?
1- polymères dont la taille varie avec le nombre de nucléotides
2- possède une forte charge négative
3- adopte une structure composée de deux brins
Pourquoi l’ADN est-elle très soluble dans l’eau?
1- molécule très chargée
2- peu de groupements hydrophobes
Comment peut-on faire varier la solubilité de l’ADN?
- Modification de la concentration saline
- Ajout d’un solvant organique
Quelle est la façon habituelle utilisée afin de précipiter l’ADN pour les concentrer ou changer son tampon?
La précipitation à l’éthanol (ou isopropanol)
Expliquer la méthode de partition de phase.
Les acides nucléiques se retrouvent dans la phase aqueuse et les protéines (dénaturées) se retrouvent dans le phénolique
À quel pH doit se retrouver la phase phénolique?
pH = 8.0 (sinon l’acide nucléique peut se dissoudre dans le phénol)
Comme le chloroforme est-il éliminé?
Précipitation avec de l’éthanol
La température d’hybritation des amores dépend de quoi?
Leurs longeurs, la composition en nucléotides,
VRAI OU FAUX
Il est préférable d’utiliser du gel de polyacrylamide lors de l’électrophorèse pour l’ADN
FAUX
À cause de leur taille, ils pénètrent difficilement dans le gel de polyacrylamide. Il faut alors procéder à l’utilisation d’un gel d’agarose
Expliquer la procédure afin d’analyse l’ADN sur un gel d’électrophorèse?
1- Charger l’ADN dans les puits
2- Utiliser un tampon contenant EDTA afin d’inhiber l’activité des nucléases
3- La séparation se fera selon la masse moléculaire
À quel pH doit être le Tampon lors de l’étape d’électrophorèse?
8.0
Comment peut-on visualiser les protéines dans le gel d’agarose?
Utiliser un colorant comme le bromure d’éthidium (cancérogène vibe)
Quelles sont les chromatographies qui peuvent être utiliser lors de l’isolation des molécules d’ADN?
1- Chromatographie par échangeurs d’ions
2- Chromatographie par filtration sur gel
3- Chromatographie par affinité
